硝酸鹽培養(yǎng)基
硝酸鉀   0.2g
蛋白     5g
蒸餾水   1000ml
PH       7.4
制法：溶解，校正PH，分裝試管，每管約5ml,121℃高壓滅菌15min。
硝酸鹽還原試劑
甲液：將對氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中。
乙液：將甲萘胺0.5g溶解于2.5mol/L乙酸溶液100mL中。
試驗方法
　　接種后在36±1℃培養(yǎng)1～4d， 加入甲液和乙液各一滴，觀察結(jié)果。硝酸鹽還原為亞硝酸鹽時于立刻或數(shù)分鐘內(nèi)顯紅色。 
　　注：本試驗陰性的原因有三：細菌不能還原硝酸鹽；亞硝酸鹽繼續(xù)分解，生成氨和氮；培養(yǎng)基不適于細菌的生長。如欲檢查培養(yǎng)基中硝酸鹽是否未被分解，可再加入鋅粉少許，可使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽而呈現(xiàn)紅色。
氧化酶
1%鹽酸二甲基對苯二胺溶液：少量新鮮配制，干燥冰箱內(nèi)避光保存。
1%α—萘酚—乙醇溶液。
試驗方法
取白色潔凈濾紙沾取菌落。加鹽酸二甲基對苯二胺溶液一滴，陽性者呈現(xiàn)粉紅色，并逐漸加深；再加α-萘酚溶液一滴，陽性者于半分鐘內(nèi)呈現(xiàn)鮮藍色。陰性于兩分鐘內(nèi)不變色。
　　 以毛細吸管吸取試劑，直接滴加于菌落上，其顯色反應與以上相同。
淀粉水解（生化試驗培養(yǎng)基，用于產(chǎn)乳酸的鏈球箘的鑒定）
蛋白胨          10g
NaCl            5g
牛肉膏          5g
可溶性淀粉      2g
蒸餾水          1000mL
瓊脂            15~20g
121℃滅菌20min
(PH7.6肉浸湯瓊脂 90mL
羊血清5mL
3%淀粉溶液 10mL
普通肉湯  100mL
葡萄糖    0.2g
PH值7.5~7.7
用法：將肉湯液瓊脂121℃高壓滅菌15分鐘，冷**50℃時，以無菌操作加入滅菌的淀粉溶液及無菌羊血清混合后，傾注滅菌平板備用。）
明膠培養(yǎng)基（蛋白胨和牛肉膏提供氮源、維生素、礦物質(zhì)；某些含明膠的細菌水解明膠，使其液化而降低明膠的膠凝作用）
蛋白胨     5g
牛肉膏      3g
明膠        120g
蒸餾水      1000mL
制法：將上述成分混合，置流動蒸汽滅菌器內(nèi)，加熱溶解，校正PH**7.2~7.4，用絨布過濾。分裝試管，121℃滅菌15min，備用）
用法：1.用接種針穿刺接種
2.將試管置于35~37℃培養(yǎng)24h。
     3將接種物放于2~8℃約10~30min，待降溫后取出觀察，如仍呈溶解狀時即為明膠液化試驗陽性，如凝固不溶者為陰性。
尿素瓊脂（蛋白胨提供氮源，滿足細菌生長需要，氯化鈉維持穩(wěn)定的滲透壓，葡萄糖為可發(fā)酵糖，磷酸二氫鉀作為緩沖劑，酚紅是指示劑，瓊脂為凝固劑。用于細菌脲酶檢測）
蛋白胨        1g
氯化鈉        5g
葡萄糖        1g
磷酸二氫鉀    2g
0.4%酚紅溶液  3mL（酚紅  0.012g）
瓊脂          20g
蒸餾水        1000mL
20%尿素溶液  100mL（尿素  20g）
pH6.6~7.0
制法: 在蒸餾水或去離子水100mL中，加入上述所有成分（瓊脂除外），混合均勻，過濾滅菌。將瓊脂加入900mL蒸餾水或去離子水中，121℃滅菌15min，冷卻**50℃，加入滅菌好的基本培養(yǎng)基，混勻后，分裝于滅菌試管內(nèi),放成斜面?zhèn)溆?
試驗方法:挑取瓊脂培養(yǎng)物接種,在36±1℃培養(yǎng)24h,觀察結(jié)果.尿素酶陽性者由于產(chǎn)堿而使培養(yǎng)基變?yōu)榧t色。
三糖鐵瓊脂(TSI)（適合于腸桿菌科的鑒定。）
原理：用于觀察細菌對糖的利用和硫化氫（變黑）的產(chǎn)生。該培養(yǎng)基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例為10:10:1，只能利用葡萄糖的細菌，葡萄糖被分解產(chǎn)酸可使斜面先變黃，但因量少，生成的少量酸，因接觸空氣而氧化，加之細菌利用培養(yǎng)基中含氮物質(zhì)，生成堿性產(chǎn)物，故使斜面后來又變紅，底部由于是在厭氧狀態(tài)下，酸類不被氧化，所以仍保持黃色。　　而發(fā)酵乳糖的細菌(e.coli)，則產(chǎn)生大量的酸，使整個培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色?！　∪缗囵B(yǎng)基接種后產(chǎn)生黑色沉淀，是因為某些細菌能分解含硫氨基酸，生成硫化氫，硫化氫和培養(yǎng)基中的鐵鹽反應，生成黑色的硫化亞鐵沉淀。
蛋白胨             20g
牛肉膏             5g
乳糖               10g
蔗糖               10g
葡萄糖             1g
氯化鈉             5g
硫酸亞鐵銨〔Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O〕 0.2g
硫代硫酸鈉         0.2g#p#分頁標題#e#
瓊脂               12g
酚紅               0.025g
蒸餾水             1000mL
pH7.4
制法:將除瓊脂和酚紅以外的各成分溶解于蒸餾水中,校正pH.加入瓊脂,加熱煮沸,以溶化瓊脂.加入0.2%酚紅水溶液12.5mL,搖勻.分裝試管,裝量宜多些,以便得到較高的底層.121℃高壓滅菌15min.放置高層斜面?zhèn)溆?。
觸媒(又稱過氧化氫酶，具有過氧化氫酶的細菌，能催化過氧化氫成為水和原子態(tài)氧，繼而形成氧氣分子，出現(xiàn)氣泡。用于鏈球菌即革蘭氏陽性球菌初步分群)
用法：（1）玻片法：取18~24h培養(yǎng)物，置于清潔玻片上，家一滴3%過氧化氫溶液，如產(chǎn)生大量氣泡為陽性。
（2）試管法：取瓊脂斜面（不含血液的）18~24h培養(yǎng)物，接種于試管內(nèi)，加入3%過氧化氫溶液1mL,如產(chǎn)生大量氣泡為陽性。
注意事項：①3%過氧化氫溶液要新鮮配制。
          ②不宜用血瓊脂平板上生長的菌落，因紅細胞含有觸媒，可致假陽性反應。
          ③取對數(shù)生長期的細菌。
Hugh-Leifson培養(yǎng)基(O/F試驗用)
蛋白胨                      2g
氯化鈉                      5g
磷酸氫二鉀                  0.3g
瓊脂                        4g
葡萄糖                      10g
0.2%溴麝香草酚藍溶液        12mL
蒸餾水                      1000mL
pH7.2
制法:將蛋白胨和鹽類加水溶解后,校正pH**7.2.加入葡萄糖,瓊脂煮沸,溶化瓊脂,然后加入指示劑.混勻后,分裝試管,121℃高壓滅菌15min,直立凝固備用.
試驗方法:從斜面上挑取小量培養(yǎng)物作穿刺接種,同時接種兩支培養(yǎng)基,其中一支于接種后滴加溶化的1%瓊脂液于表面,高度約1cm,于36±1℃培養(yǎng).
蛋白胨水(靛基質(zhì)試驗用)
蛋白胨(或胰蛋白胨)       20g
氯化鈉                  5g
蒸餾水                  1000mL
pH7.4
制法:按上述成分配制,分裝小試管,121℃高壓滅菌15min.
靛基質(zhì)試劑
柯凡克試劑:將5g對二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中.然后緩慢加入濃鹽酸25mL.
歐-波試劑:將1g對二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇內(nèi).然后緩慢加入濃鹽酸20mL.
試驗方法:挑取小量培養(yǎng)物接種,在36±1℃培養(yǎng)1～2d,必要時可培養(yǎng)4～5d.加入柯凡克試劑約0.5mL,輕搖試管,陽性者于試劑層呈深紅色;或加入歐-波試劑約0.5mL,沿管壁流下,覆蓋于培養(yǎng)液表面,陽性者于液面接觸處呈玫瑰紅色.
注:蛋白胨中應含有豐富的色氨酸.每批蛋白胨買來后,應先用已知菌種鑒定后方可使用.
β—半乳糖苷酶試驗（ONPG）（用于遲緩發(fā)酵乳糖的細菌的快速鑒定）
原理：有β—半乳糖苷酶的細菌，可以分解鄰硝基酚β—半乳糖苷（ONPG），而釋放黃色的鄰硝基酚。
方法：取新鮮細菌一環(huán)，加入到0.25mL的無菌生理鹽水中，加甲苯一滴充分振動，37℃，5min，再加入無色ONPG溶液0.25mL置于37℃水浴，懸液變黃則為陽性。
七葉苷水解試驗（主要用于D群鏈球菌與其他鏈球菌的鑒別）
原理：七葉苷可以被細菌分解為葡萄糖和七葉素，七葉素與培養(yǎng)基中的二價鐵反應，形成黑色化合物，使培養(yǎng)基變黑。
方法：將待檢測菌接種于七葉苷培養(yǎng)基上，培養(yǎng)后觀察結(jié)果。
鼠李糖培養(yǎng)基
蛋白胨                    2.7g
氯化鈉                    5.0g
磷酸氫二鉀                0.3g
1%溴麝香草酚藍水溶液     3.0mL
瓊脂                      5.0g
蒸餾水                    1000mL
制法：（1）除指示劑外將上述成分混于蒸餾水，并加熱融化瓊脂。調(diào)PH7.0后，加入指示劑，做成基礎(chǔ)培養(yǎng)基。
     （2）按0.5~1%量稱取不同的糖（醇），每種分別加入15mL蒸餾水，調(diào)PH**7.0
     （3）根據(jù)制作培養(yǎng)基的量，加如上述基礎(chǔ)培養(yǎng)基，**后分裝小試管，20分鐘滅菌，置斜面。#p#分頁標題#e#
注意事項： 苦杏仁甙按0.2～0.3%量加入。阿拉伯糖需間歇三次滅菌，或過濾除菌。